sea plus 酶底物法检测系统（程控定量封口机）使用手册说明

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一、概述
海研智能程控定量封口机是由智能电路电驱动，内部专用加热辊，专门用于51孔定量盘和 97 孔定量盘封膜作用，配合微生物检测试剂使用，提供简单、快速、准确的定量检测总大肠菌群、大肠埃希氏菌、粪（耐热）大肠菌群、肠球菌和绿脓假单胞菌的实验方案；51 孔定量盘和 97 孔定量盘是基于传统方法最大可能数 (MPN) 统计模型而设计的半自动定量方法，可定量检测出水样结果，这种方法可以替代并优于传统（滤膜、及多管发酵）方法检测水中微生物。
包装
箱内装有定量程控封口机主机、电源线、定量盘、51孔定量盘橡胶衬垫和97孔定量盘橡胶衬垫、阳性比色盘、MPN表、说明书、操作手册、保修卡等。
注意：可配备更多的定量盘橡胶衬垫便于提高工作效率。
安装调试
①打开纸箱，留下包装，以备后用。
②把机器放在一个宽敞的空间，前后要留有橡胶垫和定量盘进出空间。
③把电源插头插入机器侧边电源的插孔，然后在插入电源插座，打开封口机开关按钮，此时封口机开始自检预热，大约等待3分钟，显示屏出现“SEA”字样，封口机就进入正常工作状态。
1、通过程控定量封口机自动将水样分配到51孔或者97孔定量盘孔中封膜成独立的孔。
2、培养24小时结束后，阳性孔数可以转化为 MPN 值，可以直接读出数值。
3、51 孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-200 MPN 值。
4、97 孔定量盘可检测每 100 mL 水样中 1-2,419 MPN值。
5、整个检测过程手工操作时间小于 1 分钟。
二、适用范围:
用于水样中的绿脓假单胞菌群、肠球菌、总大肠菌群和粪大肠杆菌、大肠埃希菌、菌落总数的快速检测、可野外携带、应急、定量检测。
三、产品描述：
酶底物法检测装置由程控定量封口机、51 或 97 孔定量检测盘、100mL定量瓶、酶底物法检测试剂四部分组成，检测水样范围:饮用水、源水、瓶装水、中水、二次供水、管网水、废水、食品水、畜牧用水、医疗用水等。
 
优势特点：
酶底物法为 GB5750-2006 收录的用于大肠杆菌检测标准方法，酶底物法是目前水中大肠杆菌检测的最先进方法，目前以其方便快捷，假阳性低，适用大量样品快速检测等优点正逐步被国内检测部门所认可。
相对于多管发酵和滤膜法，酶底物法检测步骤大大减少，而且对实验环境要求不高，检测时间可减少到 24 小时，在日常水样监测及应急监测中具有很好的应用前景，可及时检测，预防，最大限度的减少重大公共安全事故的发生几率。 以GB5750-2006 中总大肠菌群测定为例，比较三种方法，如表所示。
 
表 1 多管发酵法、滤膜法及酶底物法比较统计

 
方法优势：
 
1.无需在无菌室内操作。
 
2.手工操作时间小于 1 分钟。
 
3.无需培养基制备和大量玻璃器皿灭菌。
 
4.24小时即可完成定性定量分析，无需验证试验。
符合GB5750-2006《生活饮用水标准检验方法》固定底物技术酶底物法的MMO-MUG培养基配套使用程控定量封口机，检测水样用（51孔定量盘）或（97孔定量盘）封装。
主要技术参数：
型号：  sea plus  

 
四、51孔和97定量盘操作说明

51孔和97孔定量盘灭菌消毒
定量盘与酶底物法配合使用，定量检测100ml水中微生物，将酶底物法试剂与检测水样混合后加入到51孔或者97孔定量盘中，使用程控定量封口机封膜，根据检测不同项目的培养温度和时间进行培养（24H），数出显阳性的孔格，对照MPN表读结果。
 
使用说明

【工作原理】
加入含有总大肠菌群细菌的水样，目标细菌在Minimal Medium ONPG-MUG培养基中36℃±1℃培养，总大肠菌群细菌产生的特异性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG,使培养呈现黄色；同时水样中大肠埃希氏菌产生特异性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的荧光底物MUG，产生特征性荧光。同样原理，耐热大肠菌群(粪大肠菌群)在44.5℃培养时会分解Minimal Medium ONPG-MUG培养基中的色源底物ONPG，使培养基呈现黄色。
【使用方法】
①定性测试：
第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解，36℃±1℃培养24h；
第二步、结果判读
        无色=阴性
        黄色=总大肠菌群阳性
        黄色+荧光=大肠埃希氏菌群阳性
注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色为阳性
②定量检测
第一步、在100ml水样中加入试剂，溶解；
第二步、倒入51孔定量检测盘（定量孔板）或97孔定量检测盘（定量孔板）中；
第三步、用程控定量封口机对定量检测盘（定量孔板）进行封膜，36 ℃±1℃培养24h；
第四步、定量检测盘（定量孔板）结果判读：
        无色=阴性
        黄色格子=总大肠菌群阳性
黄色+荧光格子=大肠埃希氏菌群阳性
查对照MPN表计数
注：耐热大肠群菌（粪大肠菌群）需44.5℃培养24h后，观察黄色格子为阳性结果，查对照MPN表计数。
 
列如：51孔定量盘显示阳性孔数是5，本次测量数值MPN就是5.3。

 
列如：97孔定量盘显示阳性大孔孔数是5，小孔孔数是10本次测量数值MPN就是15.8。
 

 
程控定量封口机功能示意图
封口机显示屏

封膜计数显示器   : 定量封口机已经封膜次数。
红色加热滚动条   : 封口机正在进行预热状态。
显示S E A字样   : 封口机已经达到封膜的温度。
绿色月亮图案   : 启用节能休眠模式，见本手册的“启用节能休眠模式”部分。
感叹号错误警报 ： 见本手册的“故障排除”部分。
 
面板按钮操作说明

五、操作指南
注意：如果不按照说明书使用机器，可能会有人员伤害、机器损害、其他财产损害及出现检测结果不准确。
1、按下电源开关打开封口机，机器液晶显示屏发亮自检约1秒。
2、设备预热至机器液晶显示屏从红色滚动条加热至显示“SEA”状态约3分钟，可以封膜。
3、取出酶底物法试剂倒入无菌定量瓶中加水样到100mL刻度线为止，摇匀，再倒入 51 孔或者 97 孔定量盘中,放在相应的橡胶衬垫上,确保定量盘的每个凹凸样本装入对应孔格上。
4、定量盘和橡胶衬垫插入封口机中,待检测器检测到定量盘 ,封口机开始封膜。等待约12秒封好的定量盘从封口机的后方出口推出，封膜完成。
注意:如果您需要退出定量盘(例如,如果一不小心托盘被意外地送入封口机),按住反向按钮。
警告:如果橡胶垫已经完全进入输入槽，不要反向运动。
5、封口完毕不使用的时候关掉封口机或使用睡眠模式。
当睡眠模式被启用,封口机即进入低功耗模式，当化验员重新封口时，此时的封口机达到封膜温度速度比冷启动快。
禁用睡眠模式：按下节能按钮,月亮图标消失。
启用睡眠模式：再次按下节能按钮,显示屏上显示月亮图标。
6、注意长时间不使用后，关闭侧边开关按钮。
故障排除特别提示:
如果下列解决方案未能解决问题,请联系西安海研生物科技有限公司
技术服务部：029-81123665
症状显示
1内部温度故障
封口机的内部温度超过允许封口的温度，加热器会自动关闭以便保持安全温度，过热可能是机器使用过于频繁或者实验室环境过热造成，耐心等待直到绿灯亮即可。
2温度读数故障
加热辊温度不能正确辨读，请重启机器即可。
3检修门故障
当机器运行时，检修门敞开时会出现该错误，您只需关检修门即可。
4电压故障
封口机使用 220V±10V,10A,50HZ 交流电，机器出现该代码可能是电压波动造成电源不稳定的输入电压。
5加热辊温度故障
加热辊的温度不在最优密封温度范围内，原因可能是由于一个接一个的密封多个冷样本造成，或者仪器刚打开还没有到达最佳温度，等待绿灯出现后再继续密封样本。
6温度稳定性故障
温度在两个值之间连续跳动，检查辊有无污染和碎屑，如果有需要清洁辊，参见“清洁和维护”。
7密封时温度故障
在封口过程中出现温度错误温度突然低于封口所需温度，封口结束后错误代码消失，可能是样品温度过低造成，建议等绿灯亮后再插入定量盘。
清洁和维护
清洗橡胶衬垫
可使用高压灭菌锅或用中性洗洁剂、稀释的漂白剂或异丙醇来作为日常清洗的试剂当处理类似酸类样品时，如果橡胶垫上出现污垢后一定要进行清洁，且在使用前确保橡胶垫是干燥的状态。
清洁封口机外部
使用柔软的干布清洁封口机外壳，用中性洗洁剂、稀释的漂白剂或者异丙醇来作为日常清洗的试剂当处理类似酸类样品时。
清洁封口机内部
1、关掉封口机电源开关，拔掉电源线,让它冷却室内常温。
2、打开封口机检修门。
3、清洁加热辊及转动胶辊。
4、关闭封口机检修门，门返回到关闭位置。
a)使用用水浸泡的软布或海绵，清除转动辊残骸。
b)用软布蘸温和的洗涤剂,稀释漂白剂或异丙醇。
c)使用纸巾或软干布擦干滚筒,干燥。
警告:当内部温度高时，请勿触摸加热辊。
•对顽固的污垢如有不干净的白色的绝缘层，用清洁剂浸泡。
•不要使用研磨材料清洁。
•不要使用腐蚀性的清洁剂。
服务政策
西安海研生物科技有限公司严格按照《 生活饮用水标准检验方法GB/T 5750.12-2006》为消费者提供酶底物法仪器及配套产品。
联系我们
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